Studio della funzionalità del sistema GABAergico nel Sistema nervoso Periferico mediante l'utilizzo di topi transgenici con mutazione condizionale per il recettore GABA-B1 nelle cellule di Schwan

Le neuropatie periferiche sono un problema di salute di eziologia eterogenea per le quali non sono ancora disponibili trattamenti affidabili. Sulla base dei nostri risultati, i ligandi GABAergici potrebbero essere nuovi fattori promettenti per la terapia . La rilevanza del sistema GABAergico , infatti , �? stata recentemente dimostrato nel PNS . In particolare , i recettori GABA - A e GABA - B sono funzionalmente attivi nelle cellule di Schwann , dove partecipano nel controllo della proliferazione cellulare e mielinizzazione . Studi molto recenti eseguiti in topi GABA-B1 ko hanno rivelato che diversi parametri biochimici, morfologici e funzionali del PNS dipendono recettori GABA - B . Per esempio GABA-B1 ko mostrano alterazioni morfologiche e molecolari di mielina, inclusi cambiamenti nell'espressione delle proteine della mielina PMP22 e P0 . Inoltre, le piccole fibre mieliniche e piccoli neuroni DRG risultano più abbondanti in GABA-B1 ko. Pertanto, i topi GABA-B1 ko mostrato guaine mieliniche alterate, anche se un coinvolgimento del compartimento neuronale del PNS (ad esempio, i piccoli neuroni DRG o motoneuroni ) potrebbe essere ipotizzato. Complessivamente i nostri dati hanno evidenziato l'importanza dei recettori GABA-B nella mielinizzazione . del SNP. Tuttavia, questi topi presentano cambiamenti delle funzioni sensoriali, sostenendo il ruolo dei recettori GABA-B anche nella nocicezione periferica. Per quanto riguarda la nocicezione , �? ben noto che i pazienti CMT presentano sintomi di dolore neuropatico, tra cui bruciore o disestesie di piedi e mani.
Al fine di considerare i diversi aspetti di questo nuovo sistema GABAergico , il ruolo del recettore GABA-B in nella fisiologia del SNP verrà ulteriormente analizzato nei topi condizionali che specificamente non hanno il recettore GABA-B1 in cellule di Schwann o in motoneuroni. Il gene knockout condizionale rappresenta un approccio efficace per studiare la funzione dei singoli geni nel sistema nervoso (Gavériaux - Ruff C. , 2007) . Il sistema Cre-loxP �? una tecnologia per il controllo spaziale e temporale di inattivazione genetica. Con questo approccio, i topi con siti LoxP fiancheggianti il gene GABA-B saranno incrociati rispettivamente con i topi P0-Cre (per specifiche knockout GABA-B1 nelle cellule di Schwann) o con HB9-Cre (per knockout specifico in motoneuroni). Questi topi saranno studiati per la biochimica, morfologica e morfometrica, comportamentale e analisi nocicettiva del PNS. I dati preliminari già ottenuti in topi condizionale P0-Cre/GABA-B1 fl/fl in cellule di Schwann suggeriscono fortemente che queste cellule sono colpite. Questi topi condizionali hanno mostrato una diminuzione dello spessore della mielina, con anomalie, delaminazioni e apoptosi nelle cellule di Schwann. L'incremento fibre amieliniche si basa fortemente su una correlazione con lo stato iperalgesico osservato. I dati indicano che la morfologia nei topi P0-CRE/GABA-B1 �? diverso da quello precedentemente pubblicato per il ko GABA - B1 - / - mice e merita ulteriori indagini.
La nostra ricerca sarà indirizzata a individuare nuove possibili strategie terapeutiche per il trattamento delle neuropatie periferiche (come le malattie CMT), la gestione del dolore cronico associato e la gestione del fenotipo. Questa �? una sfida per i neurologi base, in quanto una terapia affidabile di queste patologie non �? ancora disponibile e il nostro progetto può contribuire alla comprensione dei meccanismi relativi alle malattie neuromuscolari.

Principal Investigators:

VALERIO MAGNAGHI

Financing institution:

AFM-TELETHON - ASS. FRANCAISE CONTRE LES MYOPATHIES

Type:

INTLI - Finanziamenti internazionali

Project leader:

UNIVERSITA' DEGLI STUDI DI MILANO

Year:

2009

Duration:

Status:

Closed